Стволовые клетки

07 Февраля 2012

Стволовые клетки - миф или реальность?

Термин стволовые клетки введен в научный обиход русским гистологом Александром Максимовым в 1909 году. Затем, в 1998 году Д. Томпсон и Д.Герхард выявили бессмертную линию эмбриональных стволовых клеток.

Стволовых клеток в нашем организме мало:

• у эмбриона - 1 клетка на 10 тысяч,
• у человека в 60 = 80 лет - 1 клетка на 5 - 8 миллионов,
• у растений - тоже есть, так называемые камбиальные (лат.- обмен, смена).

Стволовые клетки - это недифференцированные клеточные элементы, обладающие свойствами обновления и дифференцировки.

Сейчас существует квалификация стволовых клеток по источникам их выделения:

• эмбриональные
• фетальные ( из абортивного материала)
• стволовые клетки взрослого человека.

Фетальные стволовые клетки запрещены к использованию и применению Министерством здравоохранения, ввиду этического аспекта, а также в связи с тем , что можно заразиться СПИДОм, цитомегаловирусом и другими инфекциями, и может вызывать рост злокачественных и доброкачественных опухолей.

Рассмотрим наиболее часто применяемый способ заготовки и применения стволовых клеток - из пуповины.

До момента помещения концентрата стволовых клеток пуповинной крови на постоянное криогенное ( в холоде)  хранение происходит следующая технологическая цепочка:

1. Забор пуповинной крови
2. Тестирование и типирование клеток
3. Выделение стволовых клеток
4. Расфасовка и маркировка стволовых клеток
5. Карантинное хранение
6. Хранение концентрата стволовых клеток пуповинной крови.

Забор пуповинной крови

Забор пуповинной крови осуществляется специально обученным персоналом родильного дома или специалистом банка стволовых клеток.

Процедура сбора пуповинной крови очень проста: сразу после рождения ребенка пуповина пережимается зажимом и пересекается. Врач обрабатывает пуповинный канатик дезинфицирующим раствором, чтобы уменьшить риск контаминации (попадание в определённую среду примесей, микроорганизмов, а также загрязнение кожи и слизистых оболочек организма).

Далее доктор пунктирует пуповинную вену иглой, подсоединенной к стерильной системе для забора крови. Кровь из пуповины и плаценты самотеком поступает в контейнер с антикоагулянтом – специальным веществом, препятствующим свертыванию крови. Вся процедура занимает несколько минут. При естественных родах забор может осуществляться как до рождения плаценты, так и после. В случае родоразрешения методом кесарева сечения, забор пуповинной крови происходит только после отделения плаценты.

2.Маркировка стволовых клеток 

Как только контейнер с пуповинной кровью поступает в  лабораторию, ему сразу же присваивается уникальный идентификационный номер – штрих-код, который также проставляется на всю документацию и расходные материалы, в которых будет происходить дальнейшее хранение.

3.Тестирование крови на стерильность и типирование 

В лаборатории до начала выделения стволовых клеток из каждого образца собранной крови отбирается около 8 мл для проведения лабораторных тестов и типирования.

Типирование – анализ клеточного состава пуповинной крови - проводится на современном проточном цитофлуориметре. После проведения типирования будет определено количество стволовых клеток и общее количество клеток в образце.

Следующим этапом проводится тестирование крови на наличие вирусных и бактериальных инфекций. Отобранная в лаборатории кровь отправляется в другую сертифицированную лабораторию, где проводят анализы.

Если результаты всех тестов отрицательны, то кровь перемещается на постоянное хранение, а Вам заказным письмом с уведомлением или курьером отправляется Паспорт пуповинной крови.

Если положительным окажется результат микробиологического «посева», то кровь будет помещена на хранение после Вашего согласия, а в случае выдачи клеточного материала он будет дополнительно обработан специалистами  Банка.

Наличие бактериальных агентов в материале не оказывает отрицательного влияния на хранение и применение данного материала. При получении положительного результата по антигенам RW, Anti-HCV, HBs-Ag, Anti-HIV–1, -2 будет дополнительно отобран еще один образец для проведения лабораторного тестирования в референсной лаборатории.

При повторном получении положительного анализа кровь будет утилизирована в соответствии с Приказом Министерства Здравоохранения РФ о 25 июля 2003 года № 325, и Вам будет направлено уведомление с результатами анализов.

Если результат повторных анализов будет отрицательным, образец будет помещен на постоянное хранение.

4.Выделение стволовых клеток  

Забор стволовых клеток из пуповинной крови - многоэтапный процесс. Все манипуляции с клеточным материалом проводятся в специальных сертифицированных «чистых» помещениях, оснащенных системой подачи чистого воздуха.

Квалифицированные специалисты работают с применением только одноразовых материалов. После того, как отобран материал для тестирования и типирования, в пакет с пуповинной/плацентарной кровью вводят специальные реагенты для осаждения эритроцитов. После осаждения эритроцитов фракцию, содержащую гемопоэтические стволовые клетки, при помощи плазмоэкстрактора отделяют от эритроцитарного осадка. Контейнер с эритроцитами удаляется. Пакет с клеточной массой центрифугируют для отделения излишков плазмы. К клеточной массе добавляют криопротекторы, которые защищают клетки от гибели при замораживании.

5.Расфасовка стволовых клеток 

Один из последних этапов в работе с клеточным материалом - это помещение выделенных и обработанных стволовых клеток в специальные пакеты для заморозки, предварительно отобрав по 2 мл для каждой ампулы - спутника. Пакет и ампулы-спутники помещаются в специальный программный криозамораживатель, в котором они постепенно охлаждаются до температуры -80˚С, далее хранение производится в парах жидкого азота при температуре -196˚С.

6.Карантинное хранение 

Один из последних этапов в работе с клеточным материалом - помещение выделенных и обработанных стволовых клеток в специальные пакеты для заморозки, предварительно отобрав по 2 мл для каждой ампулы-спутника. Пакет и ампулы-спутники помещаются в специальный программный криозамораживатель, в котором они постепенно охлаждаются до температуры -80˚С, а далее хранение производится в парах жидкого азота при температуре -196˚С.

7.Хранение стволовых клеток 

После полной заморозки пакет с клетками и ампулы-спутники помещают в карантинное криохранилище.

Карантинное хранение осуществляется до получения результатов лабораторных тестов о чистоте клеточного материала.

После получения отрицательных результатов лабораторных тестов на вирусные инфекции, проверенные по всем показателям образцы перемещаются на постоянное хранение. После этого Вам отправляется паспорт пуповинной крови с полной характеристикой сохраненного материала.

Зачем все это нужно?

Во – первых, по собранной пуповинной крови Вашему малышу могут провести гематологический и аллерго-иммунологический анализы, чтобы определить, может ли он в дальнейшем заболеть какими-либо из этих заболеваний. И если вдруг с возрастом малыш заболеет серьезным заболеванием , то, благодаря собственным стволовым клеткам, сможет победить болезнь.

Самые крупные Центры – это:

• в Москве - Гемобанк, Криоцентр  (при НИИ акушерства и гинекологии),
• Санкт - Петербурге,
• Казани.

Забор пуповинной крови и приготовление стволовых клеток стоят в среднем от 50 000 до 80 000 рублей, ежегодно за хранение оплата 3 200 - 4 000 рублей. Все это обговаривается при заключении контракта и договора с Вами. Обязательно уточните все нюансы, которые Вас интересуют.

Хранить клетки можно всю жизнь.

Стволовые клетки уникальны - они позволяют лечить в современной медицине более 50 тяжелейших заболеваний:

• острые и хронические лейкозы,
• врожденные заболевания,
• нарушения обмена веществ,
• наследственные расстройства иммунной  системы,
• онкозаболевания,
• хромосомные болезни.

Стволовые клетки применяются в косметологии, но это - очень спорный момент. Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения выдала первое разрешение на применение новой технологии только 1.07.2010 года- ФС № 2010255 ( лечение собственными стволовыми клетками). Следовательно, вся реклама косметологических Центров о применении чужих стволовых клеток - незаконна.

Вообще, во всем мире идут постоянные дебаты и дискуссии о стволовых клетках.

 Доказано лишь одно - лечебный эффект приносят свои собственные стволовые клетки, так как они не отторгаются и воспринимаются своим организмом, либо стволовые клетки ближайших родственников. А вот с чужими стволовыми клетками, так же как и с фетальными, шутки плохи: обещая вечную молодость, можно получить серьезное заболевание.